4. PROCEDIMENT EXPERIMENTAL

4.3. Preparació de l'inòcul

En aquesta pràctica el microrganisme emprat  és una soca de E. coli K12 proporcianada per la colección española de cultivos tipos (CECT ) i adquirida com a liofilitzat. Les intruccions per a la resuspensió del mateix i la obtenció d’un cultiu viable es descriuen en el següent arxiu: instruccions per a la ressuspensió de l'inòcul i sembra.

Es seguiran les instruccions de seguretat en la manipulació de microorganismes descrites en instruccions de seguretat en la manipulació de microorganismes.

Material

• Plaques de TSA
• Medi de cultiu mínim i complex
• 2 provetes de 100 mL (esterilitzades a l’autoclau)
• 1 Erlenmeyers de 500 mL  tapat  amb cotó hidròfob envoltat de gasa (esterilitzat a l’autoclau)

Procediment

El fermentador s’inocularà  amb un cultiu d’Escherichia coli obtingut segons el següent procediment:

• Dos dies abans de la pràctica, es realitza una sembra d’E.coli  en estries en una placa de Petri amb medi sòlid (TSA) i s’incuba a 30 ºC durant 24 h.
• El dia abans de la posta en marxa del fermentador, cal inocular amb dues o tres colònies aillades de la placa de Petri, un matràs amb 100 mL del mateix medi de cultiu que s’utilitzarà pel creixement en el fermentador i es deixa incubar durant tota la nit a 30º C en un agitador orbital.